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Cat. Number
HC-02-05-01
Chemical Name
血漿血清外泌體親和提取試劑盒
Qty 1
1KIT
Stability
2-8℃
References


血漿血清外泌體親和提取試劑盒


產品概述:

血漿血清外泌體親和提取試劑盒在磁珠捕獲法的基礎上進行改良優化,添加了 CD9/CD81/CD63 三種磁珠可特異性捕獲EVs 表面的標志性蛋白。以CD9 磁珠為例,EVlent 中的功能化磁珠可以高效地將 EVs 捕獲到裝配了EVs 特征蛋白CD9抗體的修飾珠上,這些磁珠對EVS 表面的 CD9 蛋白具有獨特親和性,可滿足多種下游實驗需求,如外泌體-細胞共培養實驗、蛋白組學研究、NGS 高通量測序和 WB 檢測等。


產品組分及儲存條件:

名稱規格儲存條件
EVlent magnetic1mL4℃
Incubation Buffer I50 mLRT
Incubation Buffer II50 mLRT
Washing Buffer50 mL4℃
Elution Buffer20 mLRT

操作流程

1.血漿樣本離心(2000 g、5-10 min) 取上清備用,-80℃長期保存,避免反復凍融。

2.取200 pL血漿,加入800 uL 預冷Incubation buffer l,室溫混勻。

3.加入40 uL EVlent magnetic beads,室溫搖勻育 2-3 h。

4.用磁力架磁吸 3 min,分離棄去上清,再加入1mLIncubation buffer ll,上下顛倒搖勻20次磁吸分離棄去上清。

5.加入1mLWashing Buffer,上下顛倒搖勻 20 次,磁吸3 min 分離棄去上清。重復該步驟2次

以下步驟需根據下游實驗需求,選擇相應的操作方法:


若下游為蛋白組學研究(優先推薦)

a.將步驟5得到的 beads,加入 50 uL Lysis buffer;

b.按照實驗室常規的組學前處理步驟處理即可,或者選用組學前處理試劑盒進行處理快速且高效。


若下游為WB表征研究

a.將步驟5得到的 beads,加入4XLDS 上樣緩沖液 (B0007,Invitrogen);b.95°C煮5 min 后,磁性分離后,吸取上清進行 PAGE 膠上樣。


若下游為NTA和TEM檢測

a.加入100 uLElution Buffer,渦旋震蕩10 min 后,磁吸3min 收集上清。b.再次加入 100 LElution Buffer,渦旋震蕩 10 min 后,磁吸3min 收集合并上清備注: 若下游為 NTA/TEM 檢測則需酌情增加血漿樣本量,建議 500 uL 效果更佳


注意事項和免責說明

1.磁珠靜置后會沉淀,每次使用磁珠前請溫和、充分的震蕩,使磁珠保持均勻的懸浮狀態。

2.ELUTION BUFFER 有刺激性氣味,請盡量在通風櫥內使用。

3.磁珠保存及使用過程中應避免冷凍、干燥和高速離心等操作,否則會破壞磁珠結構,影響蛋白結合能力。

4.血漿血清外泌體親和提取試劑盒僅限于專業人員的科學研究使用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品。


上?;菡\生物科技有限公司自2010年成立以來,一直致力于為客戶提供試劑,儀器設備和耗材一站式服務。目前在蘇州和南通的研發生產基地,專注于體外診斷蛋白,靶標蛋白,工業用酶和細胞因子的生產和定制,按照GMP標準,為工業客戶提供大包裝蛋白原料。


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